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2020版《中國藥典》一部中藥材中黃曲霉毒素的檢測

2020-08-12

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黃曲霉毒素(AFT)是一類真菌(如黃曲雷和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,其衍生物有約20種,分別命名為B1、B2、G1、G2、M1、M2、GM、P1、Q1、毒醇等,其中以B1的毒性更大,致癌性更強(qiáng)。(歡迎索取紙質(zhì)數(shù)據(jù)。)

黃曲霉毒素主要存在于藥材、谷物、堅(jiān)果、棉籽以及動(dòng)物飼料相關(guān)的產(chǎn)品中。當(dāng)人攝入量大時(shí),可發(fā)生急性中毒,出現(xiàn)急性肝炎、出血性環(huán)死、肝細(xì)胞脂肪變性和膽管增生。當(dāng)微量持續(xù)攝入,可造成慢性中毒,生長障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。

各級(jí)食品藥品監(jiān)管部門不斷加大中藥生產(chǎn)流通監(jiān)管力度,努力保持中藥質(zhì)量總體穩(wěn)定。

色譜條件

色譜柱:月旭Ultimate? ODS-3 (4.6×300mm,5μm);

流動(dòng)相:甲醇/乙腈/水=300/220/480;

柱溫:30℃;

檢測波長: 激發(fā)波長:360nm,   

發(fā)射波長:450nm;

衍生方法:光化學(xué)衍生;

流速:0.8mL/min;

進(jìn)樣量:25μl。

流動(dòng)相的配置

流動(dòng)相配制:精密量取甲醇300ml、乙腈220ml、超純水480ml,充分混勻后經(jīng)0.45 μm濾膜抽濾,即得。

樣品溶液的制備

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:精密量取黃曲霉毒素混合對照品溶液(黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2標(biāo)示濃度分別為1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml)1ml,置于20ml容量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,作為標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液,搖勻,備用。

混合對照品溶液:精密量取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1ml,置于25ml容量瓶,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。

供試品溶液:取供試品粉末15g,精密稱定,置于均質(zhì)瓶中,加入氯化鈉3g,精密加入70%甲醇75ml。高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000r/min);離心5分鐘(離心速度4000 r/min),精密量取上清液15ml,置于50ml容量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,離心10分鐘(4000 r/min),精密量取上清液20ml,通過月旭Welchrom?黃曲霉毒素免疫親和小柱,流速3ml/min,用20ml水洗脫,棄去洗脫液,使空氣進(jìn)入柱子,再用1.5ml甲醇洗脫,收集洗脫液,置于2ml容量瓶,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜過濾,取續(xù)濾液,即得。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密吸取上述混合對照品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl注入液相色譜儀,測定峰面積。以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

結(jié)果匯總

中藥中黃曲霉毒素測定結(jié)果匯總

中藥

品種

加標(biāo)水平

加標(biāo)回收率(%)

G2

G1

B2

B1

柏子仁

B1:

1.0μg/kg


B2:

0.3μg/kg


G1:

1.0μg/kg


G2:

0.3μg/kg

90.24

95.67

96.70

88.94

薏米

115.55

107.62

113.91

91.83

檳榔

82.03

82.26 

92.86 

83.64

炒麥芽

93.48

94.10

97.54

86.07

大棗

97.71

106.45

109.86

103.66

地龍

100.63

108.59

114.85

101.98

蓮子

103.03

112.80

112.64

106.15

胖大海

80.42

97.10

98.06

92.55

全蝎

84.51

84.83

80.69

81.11

酸棗仁

102.12

110.54

110.29

103.47

蜂房

105.65

109.05

96.05

111.00

使君子

80.75

83.25

67.74

78.59

桃仁

104.66

104.33

108.96

108.23

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