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全面解析Tandex LH-20

2022-01-07

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Tandex LH-20是在葡聚糖凝膠Tandex G-25的基礎(chǔ)上經(jīng)羥丙基化處理后得到的產(chǎn)物,不僅可在水中應(yīng)用,也可在極性有機(jī)溶劑或他們與水組成的混合溶劑中膨潤使用,適合中藥有效成分的分離純化以及抗生素和化學(xué)藥物的精細(xì)純化。

一、原理

Tandex LH-20的分離原理主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因?yàn)槟z過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強(qiáng),更后出柱。如果使用反相溶劑洗脫,Tandex LH-20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強(qiáng),后出柱。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。

二、溶劑系統(tǒng)

Tandex LH-20常選用單一的溶劑系統(tǒng),應(yīng)用更多的是極性強(qiáng)弱不同的如下五種:水、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷。根據(jù)溶劑極性的不同,樣品分別發(fā)生正相或反相分配作用。

除水以外,甲醇是多年來一直使用的極性更強(qiáng)的流動相。當(dāng)甲醇作為流動相時(shí),Tandex LH-20的保留行為:芳香族化合物>脂環(huán)族化合物>脂肪族化合物。甲醇作為流動相的另一個(gè)特點(diǎn)是:對不同芳香族化合物可選擇性保留,這取決于苯環(huán)上存在的官能團(tuán)及雜原子性質(zhì)、數(shù)目和位置。苯環(huán)上存在的官能團(tuán)及雜原子減弱了苯環(huán)本身的性質(zhì)。苯環(huán)上所帶的OH-越多,極性越強(qiáng),在Tandex LH-20上滯留的時(shí)間越長。堿性物質(zhì)比酸性或中性物質(zhì)在Tandex LH-20上滯留的時(shí)間更長。

三、樣品的處理和洗脫溶劑的選擇

如果樣品極性大,選用反相溶劑洗脫(甲醇-水),樣品用更少體積的甲醇-水(盡可能甲醇少一些)溶解,過濾后,濕法上樣(必須要進(jìn)行過濾,否則造成Tandex LH-20堵塞后,就必須將葡聚糖凝膠LH-20的柱頭部分棄去,造成不必要的浪費(fèi))。如果樣品極性小,選用正相溶劑洗脫(氯仿-甲醇),樣品用更少體積的氯仿-甲醇溶解,過濾后,濕法上樣。

四、葡聚糖凝膠LH-20的分離技巧

● 流速要控制好,流速不可太快,為了快加壓,分子篩效果會降低:過慢會導(dǎo)致樣品在柱子擴(kuò)散嚴(yán)重,達(dá)不到分離效果。

● 柱子盡可能長,Tandex LH-20柱長的增加將極大地改善分離,所以不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。

● 餾分一定要接的細(xì),可1/10,或1/20個(gè)保留體積接成一餾分。

● 洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積,對特殊保留強(qiáng)的化合物,可洗脫5個(gè)保留體積。

● 如果黃酮類化合物粗提物中有鞣質(zhì),那么你就要小心了,Tandex LH-20對鞣質(zhì)幾乎是死吸附的。如果不考慮填料,可用Tandex LH-20分鞣質(zhì)。

● 填料可反復(fù)使用,每次用完,可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來。

五、注意事項(xiàng)

1. 上樣之前,樣品必須經(jīng)過膜過濾及去除色素,否則雜質(zhì)及色素會被吸附到填料上,影響填料的正常使用;

2. 在使用過程中,避免使用高濃度的強(qiáng)酸強(qiáng)堿,酸和堿的濃度應(yīng)低于0.15摩爾。堿會使流速變慢;

3. 不同的樣品,吸附和洗脫方法不相同,可以根據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)進(jìn)行。

六、性能參數(shù)

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七、訂購信息及相關(guān)產(chǎn)品

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