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柱壓偏高的原因排查及解決方案-下篇

2022-01-11

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之前在上篇中小編已經(jīng)給大家分享了幾點(diǎn)原因及解決方案,今天繼續(xù)為您分析解答。

 

五、色譜柱保存不當(dāng)

原因:色譜柱如較長(zhǎng)時(shí)間不用,重新啟用后需按說(shuō)明書(shū)的活化方法重新活化后再使用,否則也會(huì)出現(xiàn)柱壓升高,柱效下降。

解決辦法:按說(shuō)明書(shū)重新活化色譜柱。 

原因:除另有規(guī)定外,一般反相色譜柱都需保存在高比例有機(jī)相中,以防止微生物滋生。否則,重新啟用時(shí),會(huì)因微生物滋生而導(dǎo)致柱壓異常升高。 

解決辦法:這種情況,可以嘗試用乙腈--TFA=50-50-0.1低流速過(guò)夜沖洗色譜柱。

 

六、樣品污染

原因:待檢測(cè)樣品成分復(fù)雜,部分成分死吸附在柱頭端,導(dǎo)致柱壓升高,柱效下降。 

解決辦法1中藥項(xiàng)目往往樣品會(huì)比較臟,使用一定時(shí)間后,會(huì)因柱頭污染導(dǎo)致色譜柱性能下降,這種情況下,可將色譜柱反接并按說(shuō)明書(shū)的異常沖洗方法進(jìn)行沖洗。

解決辦法2加保護(hù)柱,保護(hù)柱為一種犧牲式攔截污染,有一定的使用壽命。做的過(guò)程中關(guān)注柱壓,如柱壓升高10%,則需更換保護(hù)柱芯。有些柱溫箱無(wú)法放入保護(hù)柱,則可償試將保護(hù)柱接在柱前,進(jìn)樣品后,但這種情況需對(duì)比不加保護(hù)柱的分析圖譜,確定沒(méi)有因保護(hù)柱與檢測(cè)色譜柱的柱溫差異而產(chǎn)生色譜圖差異的情況下,才可以使用。

解決辦法3檢測(cè)樣品建議采用小孔徑的濾頭或?yàn)V膜(如0.22μm)進(jìn)行過(guò)濾后再進(jìn)樣,以盡量減少污染物進(jìn)入色譜柱。

解決辦法4定期維護(hù)色譜柱(確認(rèn)為樣品污染導(dǎo)致柱效下降,而不是填料塌陷的):對(duì)于確認(rèn)是樣品污染導(dǎo)致色譜柱使用一段時(shí)間柱效下降的,建議對(duì)該項(xiàng)目使用的色譜柱反接后按說(shuō)明書(shū)的異常再生方法進(jìn)行定期維護(hù);這種處理的好處是,能減少柱子污染物聚集,延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。

當(dāng)一根柱子經(jīng)過(guò)異常再生后,性能參數(shù)仍無(wú)法滿足檢測(cè),說(shuō)明色譜柱已接近壽命,這種情況下,可以將柱子反接檢測(cè),還能再用一段時(shí)間。

檢測(cè)蛋白類樣品,容易因蛋白聚集導(dǎo)致柱壓升高,柱效下降,這種情況,可以用乙腈--TFA=50-50-0.1低流速過(guò)夜沖洗色譜柱。

 

七、其他原因

仔細(xì)檢查系統(tǒng)及操作,根據(jù)具體的原因采取相應(yīng)的措施。 

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