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示差折光檢測器屬于中等靈敏度濃度型檢測器，其響應(yīng)值取決于柱后流出液折射率的變化，采用含有樣品的流出液與不含樣品的流出液的同一物理量的示差測量。由于每種物質(zhì)都有各自的折射率，因此示差折光檢測器對(duì)所有物質(zhì)都有響應(yīng)，是一種通用型檢測器，具有廣泛的適用范圍。

在應(yīng)用開始前，使用流動(dòng)相沖洗樣品池和參比池。然后關(guān)閉參比池，讓溶劑僅從樣品池中流過。流動(dòng)相在兩個(gè)池中的示差折光相同，并且可以調(diào)整零點(diǎn)玻璃的位置，使檢測器可以達(dá)到光平衡，讓每個(gè)二極管獲得同樣的光線量。

光線自W燈經(jīng)過透鏡、狹縫之后，先后透過流通池的參比方（也叫參比池）、樣品方（也叫樣品池），再經(jīng)過反射到達(dá)終點(diǎn)——光電二極管，把光信號(hào)轉(zhuǎn)化成電信號(hào)。檢測器所輸出的信號(hào)值（基線），與A和B的能量差值有關(guān)，分析前要確保光斑處于在A和B的中間位置。

如果參比方和樣品方的成分是一樣，即光的折射角一致，光斑就會(huì)抵達(dá)光電二極管的中間位置，A和B信號(hào)差值為零，此時(shí)（歸零后）檢測器輸出的信號(hào)為零；如果樣品方的成分發(fā)生了變化，參比方和樣品方的成分變成不一致，兩者對(duì)光的折射角有差異，光斑即會(huì)落在光電二極管的偏A側(cè)或B側(cè)，檢測器會(huì)輸出一個(gè)明顯的+信號(hào)或-信號(hào)，即基線會(huì)變成正值或負(fù)值。

1.正確放置溶劑瓶和廢液瓶

要把溶劑瓶和廢液瓶放在比示差折光檢測器和容劑泵還要高的位置，這樣可以使樣品池有一定壓力，有利于優(yōu)化檢測器的性能。

2.示差折光檢測器不能用做梯度洗脫

由于介質(zhì)的改變和壓力的波動(dòng)都會(huì)影響基線的穩(wěn)定性，所以使用示差折光檢測器時(shí)不能進(jìn)行梯度洗脫。

3.保證檢測器的溫度恒定

光學(xué)系統(tǒng)和流動(dòng)相的溫度對(duì)基線的穩(wěn)定性影響很大。示差折光檢測器可在比室溫高5℃到55℃的范圍內(nèi)控溫。建議將溫度設(shè)為比室溫高5℃，并確保柱溫箱的溫度與檢測器保持一致。溫度不宜過高，因?yàn)榻橘|(zhì)的折光指數(shù)隨溫度升高而降低，溫度過高會(huì)使靈敏度降低。

4.不可讓流通池承受過大的壓力

示差折光檢測器流通池的反壓約為5bar，如果還要在系統(tǒng)里連接其他檢測器或餾分收集器，必須將它們連接在示差折光檢測器之前。即示差折光檢測器在流路系統(tǒng)里必須放在更后，如果還要在系統(tǒng)里增加一個(gè)檢測器，必須放在示差檢測器的前面，以防壓力增大時(shí)損壞流通池。

同時(shí)建議在運(yùn)輸或搬遷示差檢測器到其他場所時(shí)，流通池里更好裝有異丙醇，這是為避免在周圍環(huán)境溫度降低時(shí)使流通池破裂。

5.某些溶劑隨長時(shí)間存放而改變會(huì)造成基線的漂移

例如乙腈/水的混合物中乙腈的含量會(huì)降低，四氫呋喃會(huì)變成過氧化物，在吸濕性有機(jī)溶劑中的水量會(huì)增加，而保存在參比流通池中的溶劑如四氫呋喃會(huì)產(chǎn)生氣體。