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月旭產(chǎn)品之“打鬼捉妖記”

2022-06-27

日常的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中,您是否會(huì)遇到這樣的詭異情況。某次樣品譜圖中,突然出現(xiàn)了一個(gè)異常的峰,同樣的條件再重復(fù)一次實(shí)驗(yàn),可能又不出現(xiàn)了。異常的峰忽大忽小,時(shí)有時(shí)無(wú),“飄忽不定”,“神出鬼沒(méi)”。面對(duì)這樣的異常,您是否摸不著頭腦,惱火而又無(wú)從下手呢?小旭今天就帶您一起經(jīng)歷色譜分析中的“打鬼捉妖”。

鬼峰描述:色譜分離過(guò)程中,特別是在梯度洗脫或儀器使用時(shí)間過(guò)久容易產(chǎn)生時(shí)有時(shí)無(wú)的色譜峰,我們俗稱(chēng)鬼峰(Ghost peak)。

鬼峰的來(lái)源:

●  水有很多途徑帶來(lái)雜質(zhì)

  凈化系統(tǒng)本身

●  存儲(chǔ)容器引入和放置時(shí)間太長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)菌生長(zhǎng)

●  各種流動(dòng)相添加劑,鹽,酸,堿

●  儀器系統(tǒng)時(shí)間較久已不再純凈

●  有機(jī)污染物等

那么,我們?nèi)绾巫龉矸宓呐挪槟兀?/p>

當(dāng)出現(xiàn)鬼峰時(shí),首先可通過(guò)液相色譜儀器軟件中的“進(jìn)直接樣品”或“進(jìn)直接標(biāo)準(zhǔn)樣品”的功能,檢查污染是否來(lái)自進(jìn)樣系統(tǒng)。該功能無(wú)進(jìn)樣動(dòng)作,僅記錄當(dāng)前色譜條件下的流動(dòng)相基線。再進(jìn)樣0μL(有進(jìn)樣動(dòng)作),可排查鬼峰可能來(lái)源。

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樣品污染的排查

樣品污染,可分為樣品本身污染或降解,樣品溶劑污染,樣品溶液在樣品瓶中放置時(shí)發(fā)生降解等污染情況。對(duì)于樣品本身污染或降解,可排查不同的樣品批次之間或者新鮮樣品的檢測(cè)情況做對(duì)比;樣品溶劑污染,可新配稀釋劑;樣品溶液在樣品瓶中放置時(shí)發(fā)生降解的情況,則要考察樣品在不同稀釋劑及不同材質(zhì)樣品瓶或不同品牌樣品瓶中的穩(wěn)定性。

進(jìn)樣系統(tǒng)的污染排查

建議更換對(duì)樣品溶解性更好的洗針液(Needle Wash),常用的洗針液如90%甲醇或乙腈的水溶液。

流動(dòng)相污染

若是流動(dòng)相的污染,則要排查清楚鬼峰的來(lái)源是來(lái)自流動(dòng)相中的緩沖鹽、添加劑、水還是有機(jī)試劑。

舉例子,若方法流動(dòng)相中含有緩沖鹽相:

●  去掉緩沖鹽運(yùn)行空針若鬼峰沒(méi)有,即緩沖鹽含雜質(zhì);

●  若還有鬼峰,則延長(zhǎng)高比例水相等度運(yùn)行,運(yùn)行空針,鬼峰變大,即污染來(lái)自水相;

●  若鬼峰沒(méi)有變大,即來(lái)自有機(jī)相。

色譜柱污染

若是色譜柱污染,首先建議按照色譜柱的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行色譜柱的日常沖洗或是異常沖洗。同時(shí)也可結(jié)合色譜條件及樣品性質(zhì),調(diào)整色譜柱清洗方法。如反相色譜條件中,分析方法更高比例有機(jī)相偏低(如僅到40%),則建議每隔30-40針即梯度沖洗色譜柱。

其他系統(tǒng)性問(wèn)題造成的鬼峰

其他系統(tǒng)性的問(wèn)題造成的鬼峰,比如在紫外檢測(cè)器中,梯度方法兩相比例的改變,基線有一定改變,應(yīng)盡量避免梯度變化速率過(guò)大而帶來(lái)的梯度鬼峰。再如,壓力儀的T型接頭,連接管路的90°轉(zhuǎn)折角等,也會(huì)容易產(chǎn)生鬼峰,應(yīng)盡量避免管路彎折。

如果以上排查都解決不了鬼峰的問(wèn)題,怎么辦?。】靵?lái)看看收鬼峰更強(qiáng)法器,Ghost-Buster Column雜質(zhì)捕集小柱,該小柱可以有效吸附去除系統(tǒng)中的極性較弱的雜質(zhì),從而防止系統(tǒng)中的雜質(zhì)峰對(duì)目標(biāo)峰的干擾。其安裝在梯度混合器和進(jìn)樣器之間,不僅能夠去除流動(dòng)相中的雜質(zhì),還可以有效去除管路和混合器中的雜質(zhì)。

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